藥典委“細菌 DNA 特征序列鑒定法”征求意見稿解析及儀器配置方案

《2020版中國藥典》新增指導通則“細菌 DNA 特征序列鑒定法（征求意見稿”解析與儀器配置方案

• 指導通則信息

1. 指導通則號：尚未公布
2. 指導通則名稱：細菌 DNA 特征序列鑒定法
3. 征求意見稿發布時間：2018年8月23日
4. 公示單位：國家藥典委員會

• 檢測項目解析

    指導通則前言：細菌DNA特征序列鑒定法系以特征核酸序列作為目標檢測物，

用于藥用原料、輔料、制藥用水、中間產品、終產品（制劑）、包裝材料和環境等藥

品全生命周期質量控制中細菌的鑒定。

    指導通則正文“待檢菌測定”部分，共涉及七個流程：分離純化、核酸提取、核酸

擴增、核酸擴增產物的檢測、核酸擴增產物的純化、核酸測序、結果判定。其中，

在“核酸提取環節”質量測定部分，提出要求如下：

    待檢菌提取的核酸質量應能滿足核酸擴增的要求。采用紫外分光光度法測定模板

DNA的濃度和純度，應能夠滿足后續測試的要求，核酸濃度不宜低于10ng/μL，

A₂₆₀/A₂₈₀比值宜在1.8~2.0之間。

    在應用紫外分光光度法做核酸質量測定項目時，紫外分光光度計及附件配置要求如下：

1.常規紫外分光光度計

2.微量比色皿，容積一般在100μL左右，光程為10mm

3.核酸濃度梯度：1~5μmol/L（5~25μg/m L，堿基對13個，雙鏈）

• 儀器配置方案

    根據指導通則解析內容，藥品生產企業可能會采購紫外分光光度計來應對新版藥

典的實施，推薦以下配置方案：

• 紫外可見分光光度計主機

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• 微量樣品池架

主要用途：配合微量比色皿使用，可以提高微量樣品的測量精度。

作用：微調樣品池位置，盡可能使測量光束大限度通過微量比色皿的通光孔，提高微量樣品的測量精度。

MH181-1 型微量樣品池架（適用于TU-18系列）

MH19-1 型微量池架（適用于TU-19系列）

• 微量比色皿

石英側開孔微量比色皿

石英單側壁微量池